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電泳帶型分析

日期:2025-07-09 12:58
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摘要:電泳帶型分析

那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于電泳帶型分析:

DNA電泳需要進(jìn)行帶型分析,在實(shí)驗(yàn)過程中常會(huì)發(fā)現(xiàn)所得的帶型出現(xiàn)在這樣那樣的問題。在此,我們對(duì)DNA帶型做了相應(yīng)的分析。

 

帶型

原因分析

解決辦法

弱帶或無帶

上樣的DNA量不夠

增加DNA的上樣量,聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高

DNA降解

避免DNA的核酸酶污染

電泳時(shí)間過長(zhǎng),DNA跑出

減短電泳時(shí)間,降低電壓,增強(qiáng)凝膠濃度

EB染色的DNA,紫外光源不合適

應(yīng)用短波長(zhǎng)(254nm),增強(qiáng)紫外燈靈敏度

DNA帶缺失

小DNA帶走出凝膠

減短電泳時(shí)間,降低電壓,增強(qiáng)凝膠濃度

分子大小相近的DNA帶不易分辨

增加電泳時(shí)間,核準(zhǔn)正確的凝膠濃度

DNA 變性

電泳前請(qǐng)勿高溫加熱DNA鏈,以20mM NaCl Buffer稀釋DNA

巨大DNA鏈,凝膠電泳不合適

在脈沖凝膠電泳上分析

DNA帶模糊

DNA降解

避免核酸酶污染

DNA上樣量過多

減少凝膠中DNA上樣量

所用電泳條件不合適

電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過20V/cm,溫度<30℃,巨大DNA鏈,溫度應(yīng)<15℃,核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力

DNA樣含鹽過高

電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽

有蛋白污染

電泳前酚抽提去除蛋白

DNA變性

電泳前勿加熱,用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA

不規(guī)則DNA帶遷移

對(duì)于λ/Hind III片段COS位點(diǎn)復(fù)性

電泳前加熱DNA 65℃加熱5-10分鐘,然后在冰上冷卻5分鐘

電泳條件不合適

電泳電壓不超過20V/cm,溫度<30℃,電泳緩沖液有足夠的緩沖能力

DNA變性

以20mM NaCl Buffer稀釋DNA,電泳前勿加熱

 

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于電泳帶型分析。

 

我們上海嘉鵬科技有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測(cè)定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀紫外檢測(cè)儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠家,歡迎大家前來訂購

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